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          Megazyme試劑盒抗性淀粉的測定方法

          發布日期:2022-02-23      點擊:228
            Megazyme試劑盒用于分析a-葡聚糖(包括淀粉,糖原,植物糖原和非抗性麥芽糊精),一個樣品溶液的重復測定中,吸收值會有0.005至0.010的波動。當樣品體積為1ml時,這相當于0.05-1ml/L濃度的D-葡萄糖。如果樣品在準備過程中被稀釋,結果需要乘以稀釋倍數。例如在樣品準備時,樣品稱重,如10g/L,變異范圍將在0.02至0.05g/100g。
            抗性淀粉的測定方法:樣品使用淀粉葡糖苷酶(AMG)37℃振蕩水浴孵育16小時,在這期間,通過兩種酶的聯合作用,非抗性淀粉被溶解,水解成D-葡萄糖,孵育結束后,終止反應。離心上述溶液,收集上清勿棄,底部殘留絮狀團即為樣品中的RS,用含水的IMS洗滌絮狀團,洗滌后離心,再重復一次洗滌離心,收集離心后獲得的上清,與之前收集的上清混合。D-葡萄糖用葡糖氧化酶/過氧化物酶試劑測定,這也是對樣品中RS含量的測定,非抗性淀粉(可溶性淀粉)的測定可通過集中的上清液并定容至100mL,再用GOPOD測定D-葡萄糖完成。
            Megazyme試劑盒檢測原理:洗滌后離心,再重復一次洗滌離心,收集離心后獲得的上清,與之前收集的上清混合。小心倒出試管殘留的液體,將絮狀團置于冰水浴中,加入2MKOH溶解,邊溶解邊用磁力攪拌機劇烈攪拌。用醋酸鹽緩沖液將溶液調至中性,用AMG將淀粉定量水解為葡萄糖。D-葡萄糖用葡糖氧化酶/過氧化物酶試劑(GOPOD)測定,這也是對樣品中RS含量的測定。
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